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酮基还原酶生产工艺技术

发布时间:2020-02-15   作者:admin   浏览次数:55

1、用于酮基化合物的立体选择还原的氧化还原酶
 [简介]:本技术涉及用于通过对映体选择性酶促还原将酮基化合物转化成相应的手性羟基化合物的方法,其中所述酮基化合物在存在辅因子的情况下用氧化还原酶还原,其特征在于使用具有氨基酸序列的氧化还原酶,在所述氨基酸序列中(a)至少70%的氨基酸相同于氨基酸序列SEQIDNO:1、SEQIDNO:6和SEQIDNO:8之一的氨基酸,或(b)至少55%的氨基酸相同于氨基酸序列SEQIDNO:2的氨基酸,或(c)至少65%的氨基酸相同于氨基酸序列SEQIDNO:3的氨基酸,或(d)至少75%的氨基酸相同于氨基酸序列SEQIDNO:4的氨基酸,或(e)至少65%的氨基酸相同于氨基酸序列SEQIDNO:5的氨基酸,或(f)至少50%的氨基酸相同于氨基酸序列SEQIDNO:7的氨基酸,或(g)至少72%的氨基酸相同于氨基酸序列SEQIDNO:129的氨基酸。
2、酮基泛解酸内酯还原酶及其应用
 [简介]:本技术涉及微生物基因工程技术领域,更具体地说,涉及一种全新的源自裂殖酵母的酮基泛解酸内酯还原酶及其应用。所述酮基泛解酸还原酶对酮基泛解酸内酯具有优良的酶活性,可以催化酮基泛解酸内酯不对称还原生成D?泛解酸内酯。本技术还构建了一菌双酶反应体系,双酶重组细胞诱导产生的酮基泛解酸内酯还原酶和葡萄糖脱氢酶偶联,催化底物酮基泛解酸内酯不对称还原生成D?泛解酸内酯,通过辅底物葡萄糖的脱氢将氧化型辅酶NADP+还原成NADPH,从而实现辅酶循环。由于葡萄糖脱氢酶的催化效率远高于酮基泛解酸内酯还原酶,可以促进还原反应高速进行,极大地提高反应效率,降低成本。
3、酮基还原酶DNA分子、重组载体和菌株及应用
 [简介]:本技术涉及基因工程领域,具体涉及生产酮基还原酶的DNA分子、蛋白或多肽序列,重组载体和菌株及应用。所述酮基还原酶DNA分子,其碱基序列为SEQ?ID?NO.1所示;或者选自编码如下蛋白质(a)或(b)的基因:(a)SEQ?ID?NO.2所示的氨基酸序列组成的多肽或蛋白质;(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有酮基还原酶活性的由(a)衍生的多肽或蛋白质。本技术将突变体基因同质粒pBAD进行连接更加稳定,而且在阿拉伯糖的诱导下,发酵酶活更高,可达到120U/mL以上,具有表达量高,表达系统稳定,发酵控制简单等特点,适宜规模化生产。
4、梅岭霉素C5-酮基还原酶基因
 [简介]:一种梅岭霉素C5-酮基还原酶基因,属于基因技术领域。本技术编码C5-酮基还原酶,催化梅岭霉素糖苷配基C5-酮基还原为羟基,基因的核苷酸序列长度为936个碱基对(bp),编码311个氨基酸。根据已知的阿弗菌素生物合成基因簇序列,通过聚合酶链式反应扩增出阿弗菌素生物合成基因簇中负责催化阿弗菌素糖苷配基C5-酮基进行还原的C5-酮基还原酶基因片段,并以之为探针进行Southern杂交,从南昌链霉菌基因文库中获得包含有其同源序列的阳性科斯质粒,经过测序与功能分析,获得梅岭霉素C5-酮基还原酶基因。本技术开辟以利用组合生物合成及遗传工程技术创新微生物药物的新途径,为已知生物活性分子的高产和新微生物农药的创新提供新的技术和手段。
5、一种新型的酮基还原酶及其用于手性醇合成的方法
 [简介]:本技术提供了一种新型的酮基还原酶及其用于手性醇合成的方法,具体涉及生物技术领域,所述新型的酮基还原酶的第49位氨基酸残基、第127位氨基酸残基、第196位氨基酸残基、第324位氨基酸残基和第828位氨基酸残基发生突变;所述第49位氨基酸残基由G突变为C,所述第127位氨基酸残基由T突变为A,所述第196位氨基酸残基由A突变为E,所述第324位氨基酸残基由A突变为K。本技术本技术在实际制备手性醇时所需要的时间与现有技术相比大幅度缩短,有效缩短了制备手性醇所需要的时间,提高了手性醇的制备效率,适用于工业化生产以及实验室制备,适用范围更广。
6、新抗霉素生物合成途径酮基还原酶基因缺失菌株、构建方法及应用
 [简介]:本技术涉及医学生物工程技术领域,具体是一种新抗霉素生物合成途径酮基还原酶基因缺失菌株、构建该菌株的方法以及在制备抗肿瘤药物中的应用。本技术通过基因敲除新抗霉素生物合成基因簇中的natE基因,获得该菌株。该菌株可定向积累两个新的组分NAT?H和NAT?I,而不再产生新抗霉素NAT?A和NAT?F组分,而且新组分的产量与原有组分产量相当,并且对八种肿瘤细胞均具有显著的抑制活性,并且对大部分细胞系的抑制活性优于对照药物Cisplatin。
7、突变的2,5二酮基-D-葡萄糖酸还原酶及其基因工程表达
 [简介]:本技术为一种生物合成2,5二酮基-D-葡萄糖酸(2,5DKG)还原酶的技术,通过聚合酶链反应技术扩增,克隆到有突变的棒状杆菌2,5DKG还原酶I基因,构建适当的表达载体在大肠杆菌和欧文氏菌高效表达来实现技术目的。由2,5DKG还原酶I突变基因所表达的2,5DKG还原酶具有很高的催化活性,适用于改进葡萄糖串联发酵产生维生素C前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)的工艺。
 
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